一、儀器名稱：CytoFLEX SRT 流式細胞分選儀

Ａ. 光學系統：

1) 2 種雷射激發光源 (3 隻雷射)：

a. 90mV 405 nm, Solid-State Laser固態紫光雷射

b. 50mW 488nm，藍光固態雷射。

c. 100mW 638nm，紅光固態雷射。

2) 可偵測 10 種螢光，未來最高可升級至 4 種雷射及偵測 15 種螢光。

Ｂ、液流系統:

流動室(Flow Cell)：光學整合型420um × 180um石英流動室；即使移動儀器也無需做光學校準(alignment)。

三種樣品流速：Low (10ul/min), Medium (30ul/min)及High(60ul/min)；可手動調整樣品流速10ul/min-240ul/min。

Ｃ、訊號處理系統:

全數位化7個對數級(7 decades)動態訊號處理範圍，24位元16,777,216 channel解析度

樣品流速每秒30,000 events (15個參數儲存)。

最小顆粒解析度: 側向散射光解析度< 300nm

二、服務項目：

本試驗項目係對送測檢體利用螢光激活細胞分選或分析達到目標細胞群體純化後純度達80%以上之目的，提出結果報告，並對試驗結果做必要之解釋。目前實驗分析範圍僅能是細胞檢體，本機台可偵測 10 種螢光。

(1)  分選類型

      ● Sorting Cells By Surface Markers

      ● Sorting Cells By Gene Expression

      ● Rare Cell Sorting

      ● Stem Cell Sorting

(2)  分選細胞種類

      ● Primary cells

      ● Bone marrow cells

      ● Tissue culture commercial cell lines

      ● Single-cell suspensions of tumors

分選收集管：

a. 4 向分選：5mL 管或15mL管。

b. 盤式分選：6-，24-，48-，96-及384-孔盤，或是

.96深孔盤及玻片；其他客製收集盤可以自行進行校正

三、注意事項：

一、分選時間之估算：依上樣流速及欲分選之細胞純度(%)推估sorting時間。例：以上樣流速3x10³ cells/sec及細胞分選前純度佔10%為例，若欲回收細胞數為1x10⁶之時間估算。欲回收細胞數1x10⁶ /(上樣流速3000 x 細胞分選前純度10%) = 所需時間約3.3 x10³(sec)。
上樣流速參考表：

細胞上機分選的流程包含三個步驟 : 設定分選區域、分選及分選後的分析。

一般而言，其所花費的時間如下：

(1) 設定分選區域約需 15-20 分鐘。

(2) 分選的時間取決於細胞數目及細胞種類，雖然機器的分選速度最高可達70,000 細胞/sec，但為得到最佳分選結果，我們通常設定分選速度為3,000 – 10,000 細胞/sec。因此，如欲分選1x107細胞，其所需分選時間約 為30-100分鐘。

(3) 分選後約需10-20分鐘去分析、列印及存檔結果。

因此，分選 1×107 顆細胞約需1-2小時。

二. 如果欲使用臨床初代人類細胞做分選實驗 請先提供檢體 HIV-;HCV/HBV- 不含傳染性病毒證明。本機台禁用含高度傳染力(含傳染性病毒)臨床檢體。 細胞如果欲分選的細胞佔細胞總數的1% 以下，雖然仍可進行分選，但常導致低純度及低回收率，故建議使用者盡量先 enrich 欲分選的細胞。

三. 上樣品前建議使用 5 mL Falcon tube (BD #352003)，收集細胞時可使用15 ml 離心管 (單或雙向分選時使用)或5 mL Falcon tube (四向分選使用)。 細胞染色後上機前務必先用 40/ 70µm nylon mesh 過濾後再上機以避免塞機。若同時有很多管樣品要進行分選，請於前一管樣品分選快結束前，再以 nylon mesh 過濾下一管樣品， 以避免細胞凝聚成團造成塞機影響分選。

四、收費標準：

五、聯絡方式：